Uma abordagem simples e abrangente para dominar as variáveis que afetam a injeção em cromatografia gasosa de alta resolução
Aquino Neto, Francisco Radler de
Palavras-chave: Injeção com divisão de fluxo, injeção sem divisão de fluxo, injeção na coluna, lacuna de retenção, alargamento de banda, captura a frio, efeito de solvente, focalização de pico, distorção de pico.
Resumo: Desde a década de 80 do século passado o comportamento das moléculas durante a injeção em Cromatografia Gasosa de Alta Resolução (CGAR) é compreendido. A alta resolução associada com a técnica só é alcançada se as variáveis de injeção são estritamente controladas e sua sinergia garantida de modo a gerar uma distribuição bem estreita dos analitos no início da coluna de separação cromatográfica (i.e., início do filme de fase estacionária). Surpreendentemente a maioria dos cromatografistas não domina esse conhecimento e simplesmente opera os sistemas de injeção de modo padronizado. Assim, a presente revisão objetiva definir de modo abrangente, mas direto, as variáveis envolvidas e sua inter-relação. Para tal, um conceito ampliado da injeção em CG é proposto, em que a “injeção” é considerada como abrangendo os processos que ocorrem desde a seringa até o início do filme de fase estacionária, passando pela câmara de vaporização, entrada do tubo capilar e lacuna de retenção, se presente. As variáveis principais que afetam a distribuição dos analitos no início da fase estacionária são a natureza química e quantidade do solvente, analitos e matriz; pontos de ebulição do solvente e analitos; dimensão, constituição e operação da agulha da seringa, câmara de vaporização, coluna capilar e lacuna de retenção, bem como a natureza do gás de arraste (H2 ou hélio), pressão de entrada do gás (e sistema de controle de pressão ou vazão), purga do septo, purga do divisor e fluxo na coluna.
Referências Bibliográficas
1. Grob, K.; Grob, G. (1976) A new, generally applicable procedure for the preparation of glass capillary columns. J. Chromatogr. A 125(3): 471-485.
2. K. Grob, G. Grob, G. (1986) Making and manipulating capillary columns for gas chromatography. Dr. Alfred Huethig Verlag, Heidelberg.
3. Desty, D.H., editor (1958) Gas chromatography 1958 proceedings of the second symposium organized by the Gas Chromatography Discussion Group under the auspices of the Hydrocarbon Research Group of the Institute of Petroleum and the Koninklijke Nederlandse Chemische Vereniging held at the Royal Tropical Institute, Amsterdam, 19-23May 1958.
4. Grob, K.; Grob, G (1969) Splitless injection in capillary columns. J. Chromatogr. Sci. 7 584-587.
5. Grob, K.; Grob, G (1978) Splitless injection and the solvent effect. J. HRC&CC 1: 57-64.
6. Grob, K.; Grob Jr., K. (1978) On-column injection on to capillary columns. J. Cromatogr. 151(3): 311-320.
7. Grob Jr., K. (1981) Peak broadening or splitting caused by solvent flooding after splitless or cold on-column injection in capillary gas chromatography. Journal of Chromatography A, Volume 213, Issue 1, 21 August 1981, Pages 3-14.
8. Grob Jr., K. (1983) Solvent effects in capillary gas chromatography. J. Chromatogr. A, 279, 25: 225-232.
9. Grob Jr., K. (1985) Band broadening in space in splitless injection. J. Chromatography A 324: 251-259.
10. Grob Jr., K (1982) Band broadening in space and the retention gap in capillary gas chromatography. J. Chromatogr. 237 (1): 15-23.
11. Aquino Neto, F.R.; Cardoso, J.N. (1992) CGAR.9. Lacunas de retenção em cromatografia gasosa de alta resolução. Química Nova 15(3): 224-227.
12. Grob Jr., K. (2000) On-Column Injection in Capillary Gas Chromatography Basic Technique, Retention Gaps, Solvent Effects 3ed. John Wiley & Sons , 591 p.
13. Grob Jr., K. (2001) Split and Splitless Injection for Quantitative Gas Chromatography: Concepts, Processes, Practical Guidelines, Sources of Error, 4th edition, 480 p. Released online for download: 11-21-2008.
14. Cardoso, J.N.; Aquino Neto, F.R. (1989) CGAR.8. Seleção da técnica de injeção de amostra em CGAR. Química Nova 12(1): 13-18.
15. Furtado, E.G.; Cardoso, J.N. (1984) Simple conversion of a Perkin Elmer model 900 GC for capillary work. J. Chromatogr. Science 22: 87-88.
16. Grob Jr., K.; Neukom, N.P. (1979) The influence of the syringe needle on the precision and accuracy of vaporizing GC injectors. JHRC&CC (1): 15-21.
17. Grob Jr., K; Schilling, B. (1987) Uncoated capillary column inlets (retention gaps) in gas chromatography. J. Chromatogr. 391: 3-18.
18. Grob Jr., K.; Neukom, H.P. (1982) Dependence of the splitting ratio on column temperature in split injection capillary gas chromatography. J. Chromatogr. 236(2): 297-306.
19. Grob Jr., K.; B. Schilling, B.(1983) Observation of a peak under the action of “phase soaking”, a gas chromatographic solvent effect, during passage through a capillary column. J. Chromatogr. A 259: 37-48.
20. Grob Jr., K.; Schilling, B. (1983) Solvent effects in capillary GC; determination of trace amounts of chloroform as an example. J. Chromatogr. 264: 7.
21. Aquino Neto, F.R. (1996) CGAR.12. Deformações de picos em CGAR.1. Principais causas. Química Nova 19(1): 73-75. 22.Stuckenbruck, P.; Aquino Neto, F.R. (1989) Behaviour of phenolic compounds related to wood tar in quantitative HRGC with on-column injection. Proceedings of the 10th International Symposium on Capillary Chromatography p. 805-811. HRC 13 (3): 210-212. (1990).
23. Grob Jr. (1984) Effect of “dirt” injected on-column in capillary gas chromatography; analysis of the sterol fraction of oils as an example. J. chromatogr. 287: 1-14.
24. Grob Jr., K.; Bossard, M. (1984) Effect of dirt on quantitative analyses by capillary gas chromatography with splitless injection. J. Chromatogr. A 294: 65-75.
25. Grob, K.; Laubli, Th.; Brechbuhler (1988) Splitless injection – development and state of the art. Including a comparison of matrix (“dirt”) effects in conventional and PTV splitless injection. J. HRGC&CC 10(2): 462- 470.
26. Castro, I.M.; Aquino Neto, F.R. (1989) The role of retention gaps in routine whole oil biomarker analyses with cold on-column injection. Proceedings of the 10th International Symposium on Capillary Chromatography p. 320-327. HRC 13 (4) 302-304 (1990)
