v4n4doi10.4322/sc.2012.018
http://dx.doi.org/10.4322/sc.2012.018
Determinación del perfil de ácidos grasos de bacterias del género Vibrio por cromatografía de gases
Fernández, Rodrigo Valenzuela; Silva, René Cortez; Garay, Miguel Zazopulos; Karmy, Jaime Carmi
Palavras-chave: Ácidos grasos, Vibrio, cromatografía gas-líquido, bacteria.
Resumo: El género Vibrio comprende varias especies de importancia clínica, muchas de ellas relacionadas con enfermedades transmitidas por los alimentos. Es conveniente contar con técnicas alternativas que apoyen la identificación de especies de géneros bacterianos como Vibrio. Se puede utilizar la cromatografía gas líquido para determinar el perfil de los ésteres metílicos de los ácidos grasos presentes en la estructura celular de los microorganismos. El objetivo del presente trabajo es determinar y cuantificar el perfil de ésteres metílicos de los ácidos grasos presentes en Vibrio vulnificus, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae y Vibrio alginolyticus, además de otras especies como Escherichia coli y Staphylococcus aureus, con el fin de determinar los ácidos grasos más relevantes presentes en los microorganismos, así como también posibles relaciones entre ellos. Para esta identificación, cada cepa de Vibrio se hace crecer en caldo soya tripticasa (TSB) con 1% de cloruro de sodio, después de la incubación se centrifuga el cultivo para separar la masa microbiana del caldo. La masa bacteriana obtenida se somete a una lisis con ondas de alta frecuencia, se le agrega una solución de hidróxido de potasio 0,5 Normal en metanol, se extrae el insaponificable, el residuo se acidifica y los ácidos grasos se extraen y metilan, inyectándose a un cromatógrafo equipado con una columna BPX-70 de 0,22 mm de diámetro y detector de ionización por llama, FID. Los resultados indican que el perfil de ácidos grasos es único para cada especie analizada y significativamente diferente, tanto para cada especie de Vibrio como para las otras bacterias consideradas. Se destacan, como indicadores de diferenciación a los ácidos grasos mirístico, palmítico, cis-oleico, trans‑oleico, cis-linoleico y araquídico. También la relación ω-9/ω-6 es significativamente distinta para cada especie ensayada. En consecuencia, el perfil de ácidos grasos puede ser una prueba alternativa para la identificación del género Vibrio a un bajo costo y tiempo relativos.
Referências Bibliográficas