Desenvolvimento e validação de método para extração e quantificação através de HPLC com índice de refração para lactose em leite pasteurizado

Acquaro Junior, Vinicius Ricardo; Madeira, Tiago Bervelieri; Castilho, Drielle Caroline; Watanabe, Lycio Shinji; Bovolenta, Yuri Renan; Nixdorf, Suzana Lucy

Palavras-chave: Carboidrato, etanol, lactose, planejamento experimental, adulteração.

Resumo: Um método simples, preciso, exato, linear em ampla faixa de trabalho e baseado em princípios da Química Verde foi desenvolvido e validado para a extração e determinação da lactose utilizando cromatografia líquida com detecção por índice de refração. A lactose, no teor mínimo definido pelo MAPA (Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento), foi o marcador de qualidade escolhido, por definir o preço do leite e auxiliar na detecção de fraudes. O leite como uma matriz de composição complexa, rica em proteínas, lipídios, carboidratos, sais minerais e vitaminas, exige um pré-tratamento adequado da amostra. Este trabalho visou desenvolver e validar uma metodologia que estabelecesse os parâmetros e condições analíticas, objetivando maximizar a porcentagem de lactose extraída do leite. Para isso, um planejamento estatístico do tipo composto central foi aplicado, considerando o tempo de centrifugação, a intensidade de rotação e a proporção de diluição entre solvente/amostra como variáveis independentes. Os tratamentos estatísticos permitiram determinar a condição de extração otimizada, com taxa de recuperação média de 105%, onde a proporção de etanol: leite foi de (4: 1, v/v), com rotação de 10.000 rpm por 37 minutos. O método proposto apresenta resolução cromatográfica adequada entre a lactulose e a lactose, emprega somente água como fase móvel e etanol no preparo da amostra, em substituição a reagentes dispendiosos e solventes tóxicos. Seu uso representa uma alternativa viável e diferenciada para a determinação do teor de lactose no leite pasteurizado comercial.

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