Análise de albendazol e metabólitos por RAM-cLC-MS/MS usando pré-concentração online direta de fluidos biológicos

Lima, Adriel M.; Lanças, Fernando M.; Santos-Neto, Álvaro J.

Palavras-chave:  Column switching, Meios de acesso restrito (RAM), Cromatografia líquida capilar, Anti-helmínticos, Preparo de amostras automatizado.

Resumo:  A análise de fármacos e outras moléculas relacionadas em fluidos biológicos é essencial no âmbito farmacêutico. Atualmente, a demanda por análises rápidas e mais complexas impulsiona a química analítica para o desenvolvimento de soluções inovadoras. A cromatografia líquida multidimensional com acoplamento de colunas para injeção direta de fluidos biológicos tem ganhado atenção nos últimos anos. Ao mesmo tempo, o acoplamento entre cromatografia líquida e espectrometria de massas proporcionou marcante desenvolvimento científico na área biomédica e bioquímica. Este trabalho avaliou a redução da escala em sistemas de column switching utilizando colunas RAM, para a análise de anti-helmínticos em fluidos biológicos. Foi desenvolvido um sistema de comutação de colunas com capilares de 200 μm de diâmetro interno. Esse sistema foi acoplado à espectrometria de massas sequencial proporcionando análises altamente sensíveis e simultâneas, com baixo consumo de amostras. A determinação de albendazol e alguns de seus produtos de biotransformação foi validada em fluidos biológicos, consumindo, por análise, menos de 8 minutos e apenas um microlitro de amostra diluída. Esse sistema capilar contrasta com os sistemas convencionais comumente utilizados, os quais consomem entre centenas e milhares de vezes mais amostra para atingir a mesma detectabilidade. Os limites de quantificação obtidos para os anti-helmínticos ficaram entre 2 a 5 ng mL-1. Os valores de precisão intra-dia e inter-dias foram inferiores à 20% para os LQs e menores que 14,5% para os outros níveis. A exatidão para os LQs foi avaliada e obteve-se valores dentro de ±20% e enquanto foram obtidos valores dentro de ±13,1% para os outros níveis. A linearidade obtida em plasma ficou entre o LQ e 500 ng mL-1 para os analitos estudados com coeficientes de correlação (r) maiores que 0,996 para todos os compostos. É importante ressaltar que o método utilizou apenas 333 nL de amostra para atingir o nível de poucos nanogramas por mililitro, enquanto métodos em escala convencional têm consumido entre 100 μL e 1 mL de amostra para atingir os mesmos níveis de quantificação.

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